别名：FLJ36605; OTTHUMP00000019224; VIM; VIME_HUMAN; Vimentin.
领域：肿瘤细胞生物免疫学生长生物学神经生物学信号转导干细胞细胞研究肿瘤细胞生物标志物
抗体来源：兔
克隆类型：多克隆
交叉反应：人类,小鼠、大鼠（预测：鸡、猪、牛、山羊）
产品应用：WB=1:500-2000, IHC-P=1:100-500, IHC-F=1:100-500, ICC =1:100, IF=1:100-500, Flow-Cyt=1μg/测试, ELISA=1:5000-10000
尚未在其他应用中进行测试。
应确定最佳稀释度/浓度
理论高度：53kDa
细胞定位：浆细胞细胞外基质
性 状：液体
浓 度：1mg/ml
免 疫 原：KLH 结合人波形蛋白合成肽：371-466/466
亚 型：IgG
封装方法：Protein A 亲和纯化
缓冲液：0.01M TBS(pH7.4 ) 含 1% BSA、0.03% Proclin300 和 50% 甘油。
保存条件：4℃运输。 -20°C 保存一年。避免重复冷冻/解冻循环。
注意事项：本产品仅供研究使用，不得用于人体、治疗或诊断应用。
PubMed：PubMed
：
：样品：
Hela（人）细胞裂解物 30 ug
Hela KO 波形蛋白（人）细胞裂解物 30 ug
主要：抗波形蛋白 (bs-0756R) 1/ 1000 倍稀释度
二级：IRDye800CW 山羊抗兔 IgG 1/20000 稀释度
预测条带大小：53 kD
观察到的条带大小：53 kD
样品：
大脑（小鼠）40 ug 裂解液
一级：1/2000 稀释度的抗波形蛋白 (bs-0756R)
二级：1/20000 稀释度的 IRDye800CW 山羊抗兔 IgG
预测条带大小：53 kD
观察到的条带大小：53 kD
样品：
泳道 1：30 ug 的 Hela（人）细胞裂解物
泳道 2：NIH/3T3（小鼠）细胞裂解物30 ug
泳道 3：30 ug 的 U251（人）细胞裂解物
泳道 4：30 ug 的 SH-SY5Y（人）细胞裂解物
泳道 5：A549（人）细胞裂解物30 ug
一级：1/1000 稀释度的抗波形蛋白 (bs-0756R)
二级：1/20000 稀释度的 IRDye800CW 山羊抗兔 IgG
预测条带大小：55 kD< br />观察到的条带大小：57 kD
样品：40 ug Jurkat（人）细胞裂解物
一级：1/300 稀释度的抗波形蛋白 (bs-0756R)
二级：IRDye800CW 1/20000 稀释度的山羊抗兔 IgG
预测条带大小：53 kD
观察到的条带大小：53 kD
多聚甲醛固定，石蜡包埋（小鼠大脑）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定，石蜡包埋（小鼠卵巢）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定、石蜡包埋（人乳腺癌）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定，石蜡包埋（人肾）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定、石蜡包埋（人结肠癌）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定、石蜡包埋（人肺癌）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定，石蜡包埋（小鼠肾）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定，石蜡包埋（人扁桃体）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定，石蜡包埋（大鼠肾）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定，石蜡包埋（大鼠结肠）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定，石蜡包埋（大鼠卵巢）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定，石蜡包埋（大鼠脑）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定、石蜡包埋（人类宫颈癌）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的 (Vimentin) 多克隆抗体 (bs-0756R) 在 4°C 下以 1:400 孵育过夜，然后用缀合二抗 (sp-0023) 孵育 20 分钟并进行 DAB 染色。
组织/细胞：小鼠肾组织； 4%多聚甲醛固定、石蜡包埋；
抗原修复：柠檬酸盐缓冲液（0.01M，pH 6.0），沸水浴15min；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶30min；封闭液（正常山羊血清，C-0005）37℃ 20 min；
孵育：抗波形蛋白多克隆抗体，未偶联(bs-0756R) 1:200，4°C过夜，然后偶联二抗(SP-0023)和DAB(C-0010)染色
多聚甲醛固定、石蜡包埋（人宫颈癌）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的 (Vimentin) 多克隆抗体 (bs-0756R) 在 4°C 下以 1:400 孵育过夜，然后使用缀合二抗 (sp-0023) 孵育 20 分钟并进行 DAB 染色。
组织/细胞：U-87MG细胞； 4%多聚甲醛固定； Triton X-100室温放置20分钟；封闭缓冲液（正常山羊血清，C-0005）37°C 20 分钟；抗体与未缀合 (bs-0756R) 的 (Vimentin) 多克隆抗体 (bs-0756R) 1:100 一起孵育，37°C 90 分钟；然后使用缀合的羊抗兔 IgG 抗体 (bs-0295G-FITC) 在 37°C 下处理 90 分钟，使用 DAPI（蓝色，C02-04002）对细胞核进行染色。
组织/细胞：HeLa细胞; 4%多聚甲醛固定； Triton X-100室温放置20分钟；封闭缓冲液（正常山羊血清，C-0005）37°C 20 分钟；抗体与未缀合的 (Vimentin) 多克隆抗体 (bs-0756R) 1:50 一起孵育，37°C 90 分钟；然后用缀合的羊抗兔 IgG 抗体（bs-0295G-FITC）在 37°C 90 分钟，使用 DAPI（蓝色，C02-04002）对细胞核进行染色。
组织/细胞：U251细胞; 4%多聚甲醛固定； Triton X-100室温放置20分钟；封闭缓冲液（正常山羊血清，C-0005）37°C 20 分钟；抗体与未缀合的 (Vimentin) 多克隆抗体 (bs-0756R) 1:50 一起孵育，37°C 90 分钟；随后加入偶联羊抗兔 IgG 抗体 (bs-0295G-FITC)，37°C 90 分钟，使用 DAPI（蓝色，C02-04002）对细胞核进行染色。
组织/细胞：U -2OS细胞； 4%多聚甲醛固定； Triton X-100室温放置20分钟；封闭缓冲液（正常山羊血清，C-0005）37°C 20 分钟；抗体与未缀合的 (Vimentin) 多克隆抗体 (bs-0756R) 1:50 一起孵育，37°C 90 分钟；然后加入偶联的羊抗兔 IgG 抗体 (bs-0295G-FITC)，37°C 90 分钟，使用 DAPI（5ug/ml，蓝色，C-0033）对细胞核进行染色。
组织/cell：小鼠间充质干细胞；
封闭液（正常山羊血清，C-0005）37℃ 20 min；
孵育：抗Vimentin多克隆抗体，未偶联(bs-0756R) 1:300，4°C过夜，然后偶联二抗(SP-0023)和DAB(C-0010)染色
空白对照：Jurkat细胞（蓝色）。 一抗：兔抗波形蛋白抗体（bs-0756R），稀释：1μg于100 μL 1X PBS（含0.5% BSA）中； 同型对照抗体：兔IgG（橙色），在相同条件下使用）； 二抗：山羊抗兔 IgG-PE（白蓝色），稀释度：1:200 在含有 0.5% BSA 的 1 X PBS 中。
实验方案
细胞用 2% 多聚甲醛固定（10 分钟） ，然后用 90% 冰冷的甲醇在冰上透化 30 分钟。一抗（bs-0756R，1μg /1x10^6 个细胞）在冰上孵育 30 分钟，然后加入 1 X 含 0.5% BSA + 1 0% 山羊血清的 PBS（15 分钟）以封闭非特异性蛋白-蛋白互动。然后将羊抗兔IgG/PE抗体加入到上述封闭缓冲液中，与一抗以1/200稀释度冰上反应30分钟。采集了20,000个事件。
空白对照：A549。
一抗（绿线）：兔抗波形蛋白抗体（bs-0756R）
稀释度：1μg /10^6 个细胞；
同型对照抗体（橙色线）：兔 IgG 。
二抗：羊抗兔IgG-AF488
稀释度：1μg/测试。
实验方案
用4% PFA固定细胞（室温10分钟），然后用90%冰冷甲醇在-20℃透化20分钟。然后将细胞在 5% BSA 中室温孵育 30 分钟，以阻断非特异性蛋白质-蛋白质相互作用。细胞用一抗在室温下染色 30 分钟。二抗在室温下使用 40 分钟。已采集20,000个事件。
领域：肿瘤细胞生物免疫学生长生物学神经生物学信号转导干细胞细胞研究肿瘤细胞生物标志物
抗体来源：兔
克隆类型：多克隆
交叉反应：人类,小鼠、大鼠（预测：鸡、猪、牛、山羊）
产品应用：WB=1:500-2000, IHC-P=1:100-500, IHC-F=1:100-500, ICC =1:100, IF=1:100-500, Flow-Cyt=1μg/测试, ELISA=1:5000-10000
尚未在其他应用中进行测试。
应确定最佳稀释度/浓度
理论高度：53kDa
细胞定位：浆细胞细胞外基质
性 状：液体
浓 度：1mg/ml
免 疫 原：KLH 结合人波形蛋白合成肽：371-466/466
亚 型：IgG
封装方法：Protein A 亲和纯化
缓冲液：0.01M TBS(pH7.4 ) 含 1% BSA、0.03% Proclin300 和 50% 甘油。
保存条件：4℃运输。 -20°C 保存一年。避免重复冷冻/解冻循环。
注意事项：本产品仅供研究使用，不得用于人体、治疗或诊断应用。
PubMed：PubMed
：
：样品：
Hela（人）细胞裂解物 30 ug
Hela KO 波形蛋白（人）细胞裂解物 30 ug
主要：抗波形蛋白 (bs-0756R) 1/ 1000 倍稀释度
二级：IRDye800CW 山羊抗兔 IgG 1/20000 稀释度
预测条带大小：53 kD
观察到的条带大小：53 kD
样品：
大脑（小鼠）40 ug 裂解液
一级：1/2000 稀释度的抗波形蛋白 (bs-0756R)
二级：1/20000 稀释度的 IRDye800CW 山羊抗兔 IgG
预测条带大小：53 kD
观察到的条带大小：53 kD
样品：
泳道 1：30 ug 的 Hela（人）细胞裂解物
泳道 2：NIH/3T3（小鼠）细胞裂解物30 ug
泳道 3：30 ug 的 U251（人）细胞裂解物
泳道 4：30 ug 的 SH-SY5Y（人）细胞裂解物
泳道 5：A549（人）细胞裂解物30 ug
一级：1/1000 稀释度的抗波形蛋白 (bs-0756R)
二级：1/20000 稀释度的 IRDye800CW 山羊抗兔 IgG
预测条带大小：55 kD< br />观察到的条带大小：57 kD
样品：40 ug Jurkat（人）细胞裂解物
一级：1/300 稀释度的抗波形蛋白 (bs-0756R)
二级：IRDye800CW 1/20000 稀释度的山羊抗兔 IgG
预测条带大小：53 kD
观察到的条带大小：53 kD
多聚甲醛固定，石蜡包埋（小鼠大脑）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定，石蜡包埋（小鼠卵巢）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定、石蜡包埋（人乳腺癌）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定，石蜡包埋（人肾）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定、石蜡包埋（人结肠癌）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定、石蜡包埋（人肺癌）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定，石蜡包埋（小鼠肾）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定，石蜡包埋（人扁桃体）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定，石蜡包埋（大鼠肾）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定，石蜡包埋（大鼠结肠）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定，石蜡包埋（大鼠卵巢）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定，石蜡包埋（大鼠脑）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的（Vimentin）多克隆抗体（bs-0756R）在 4°C 下以 1:200 孵育过夜，然后根据 SP 试剂盒（兔）（sp-0023）说明进行操作并进行 DAB 染色。
多聚甲醛-固定、石蜡包埋（人类宫颈癌）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的 (Vimentin) 多克隆抗体 (bs-0756R) 在 4°C 下以 1:400 孵育过夜，然后用缀合二抗 (sp-0023) 孵育 20 分钟并进行 DAB 染色。
组织/细胞：小鼠肾组织； 4%多聚甲醛固定、石蜡包埋；
抗原修复：柠檬酸盐缓冲液（0.01M，pH 6.0），沸水浴15min；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶30min；封闭液（正常山羊血清，C-0005）37℃ 20 min；
孵育：抗波形蛋白多克隆抗体，未偶联(bs-0756R) 1:200，4°C过夜，然后偶联二抗(SP-0023)和DAB(C-0010)染色
多聚甲醛固定、石蜡包埋（人宫颈癌）；在柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）中煮沸15分钟进行抗原修复；用3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶20分钟；封闭液（正常山羊血清）37℃ 30min；抗体与未缀合的 (Vimentin) 多克隆抗体 (bs-0756R) 在 4°C 下以 1:400 孵育过夜，然后使用缀合二抗 (sp-0023) 孵育 20 分钟并进行 DAB 染色。
组织/细胞：U-87MG细胞； 4%多聚甲醛固定； Triton X-100室温放置20分钟；封闭缓冲液（正常山羊血清，C-0005）37°C 20 分钟；抗体与未缀合 (bs-0756R) 的 (Vimentin) 多克隆抗体 (bs-0756R) 1:100 一起孵育，37°C 90 分钟；然后使用缀合的羊抗兔 IgG 抗体 (bs-0295G-FITC) 在 37°C 下处理 90 分钟，使用 DAPI（蓝色，C02-04002）对细胞核进行染色。
组织/细胞：HeLa细胞; 4%多聚甲醛固定； Triton X-100室温放置20分钟；封闭缓冲液（正常山羊血清，C-0005）37°C 20 分钟；抗体与未缀合的 (Vimentin) 多克隆抗体 (bs-0756R) 1:50 一起孵育，37°C 90 分钟；然后用缀合的羊抗兔 IgG 抗体（bs-0295G-FITC）在 37°C 90 分钟，使用 DAPI（蓝色，C02-04002）对细胞核进行染色。
组织/细胞：U251细胞; 4%多聚甲醛固定； Triton X-100室温放置20分钟；封闭缓冲液（正常山羊血清，C-0005）37°C 20 分钟；抗体与未缀合的 (Vimentin) 多克隆抗体 (bs-0756R) 1:50 一起孵育，37°C 90 分钟；随后加入偶联羊抗兔 IgG 抗体 (bs-0295G-FITC)，37°C 90 分钟，使用 DAPI（蓝色，C02-04002）对细胞核进行染色。
组织/细胞：U -2OS细胞； 4%多聚甲醛固定； Triton X-100室温放置20分钟；封闭缓冲液（正常山羊血清，C-0005）37°C 20 分钟；抗体与未缀合的 (Vimentin) 多克隆抗体 (bs-0756R) 1:50 一起孵育，37°C 90 分钟；然后加入偶联的羊抗兔 IgG 抗体 (bs-0295G-FITC)，37°C 90 分钟，使用 DAPI（5ug/ml，蓝色，C-0033）对细胞核进行染色。
组织/cell：小鼠间充质干细胞；
封闭液（正常山羊血清，C-0005）37℃ 20 min；
孵育：抗Vimentin多克隆抗体，未偶联(bs-0756R) 1:300，4°C过夜，然后偶联二抗(SP-0023)和DAB(C-0010)染色
空白对照：Jurkat细胞（蓝色）。 一抗：兔抗波形蛋白抗体（bs-0756R），稀释：1μg于100 μL 1X PBS（含0.5% BSA）中； 同型对照抗体：兔IgG（橙色），在相同条件下使用）； 二抗：山羊抗兔 IgG-PE（白蓝色），稀释度：1:200 在含有 0.5% BSA 的 1 X PBS 中。
实验方案
细胞用 2% 多聚甲醛固定（10 分钟） ，然后用 90% 冰冷的甲醇在冰上透化 30 分钟。一抗（bs-0756R，1μg /1x10^6 个细胞）在冰上孵育 30 分钟，然后加入 1 X 含 0.5% BSA + 1 0% 山羊血清的 PBS（15 分钟）以封闭非特异性蛋白-蛋白互动。然后将羊抗兔IgG/PE抗体加入到上述封闭缓冲液中，与一抗以1/200稀释度冰上反应30分钟。采集了20,000个事件。
空白对照：A549。
一抗（绿线）：兔抗波形蛋白抗体（bs-0756R）
稀释度：1μg /10^6 个细胞；
同型对照抗体（橙色线）：兔 IgG 。
二抗：羊抗兔IgG-AF488
稀释度：1μg/测试。
实验方案
用4% PFA固定细胞（室温10分钟），然后用90%冰冷甲醇在-20℃透化20分钟。然后将细胞在 5% BSA 中室温孵育 30 分钟，以阻断非特异性蛋白质-蛋白质相互作用。细胞用一抗在室温下染色 30 分钟。二抗在室温下使用 40 分钟。已采集20,000个事件。
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