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哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒
哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒
英文名称:  
尺寸: 50T 
特性:  
灭菌情况: NA 
储存条件: 按照标签标识温度保存 
产品介绍
生产的哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒(Mammalian genomic DNA extraction kit),采用了经典的蛋白酶K处理法,可以抽提到100-150kb以上的基因组DNA。用本试剂盒抽提到的基因组DNA适用于Southern杂交、基因组DNA的PCR扩增及基因组DNA文库的构建等。通常使用本试剂盒,从20毫克组织可以抽提到约40微克基因组DNA,从106-107Hela细胞可以抽提到约5-50微克基因组DNA。本试剂盒足够抽提50个常规量的样品。
组分和说明
组分 R01056-50T
样品裂解液 30mL
蛋白酶K 130ul
3M 醋酸钠 6ml
Nuclease Free Water 6ml
说明书 1份
产品应用
植物叶片等比较柔嫩的组织样品基因组DNA中目的基因的直接扩增、基因分型(如基因缺失等),以及基因敲除或转基因植物基因型分析。
产品优势
所需样品少,耐受能力高。本产品用于20μl的PCR扩增体系时,通常仅加入0.1-1mm直径叶片即可顺利完成PCR检测。
使用说明
1. 样品收集
a. 对于组织样品:切下组织,并剪切成小块,置液氮中冻结,研碎或捣碎。
b. 对于贴壁细胞:
胰酶消化后,PBS或生理盐水洗一次,1000-2000g离心1-2分钟,弃上清,收集细胞。
c. 对于悬浮细胞:
1000-2000g离心1-2分钟,弃上清,收集细胞。
2. 基因组DNA抽提
a. 样品处理完毕后,每1毫升样品裂解液中加入5微升蛋白酶K,混匀。
b. 对于上述处理好的样品,每20毫克组织或106-107个细胞中加入500微升添加了蛋白酶K的样品裂解液,颠倒混匀数次,充分裂解组织或细胞。
c. 50℃水浴消化过夜。
d. 加入500微升Tris平衡苯酚抽提样品。
e. 吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体),剩余的水相用等体积Tris平衡酚再抽提一次。
f. 吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体),剩余的水相用等体积氯仿再抽提一次。
g. 吸出约300微升上清液,加入60微升10M醋酸铵和600微升无水乙醇,颠倒数次混匀,此时可见DNA沉淀产生。
h. 10,000g 离心1分钟,弃上清。加入70%乙醇洗涤DNA沉淀两次。
i. 尽量吸除残余的乙醇,待看不到明显的液体时,立即加入50-100微升Nuclease Free Water溶解DNA。注意:不可过分干燥基因组DNA沉淀,否则会极难溶解。如果发现DNA沉淀难以溶解,可以在4℃用摇床缓慢摇动过夜,以溶解DNA沉淀。
 
保存条件:
-20℃保存,一年有效。10M醋酸铵和Nuclease Free Water也可以室温保存。 ≤0℃运输
注意事项:
(1)需自备Tris平衡苯酚、氯仿和无水乙醇。
(2)如果打算抽提到大片段的基因组DNA,则要尽量避免基因组DNA的物理性剪切。例如避免剧烈振荡含有基因组DNA的样品,可以用剪掉枪头尖的枪头吸取含有基因组DNA的样品。
(3)不可过分干燥基因组DNA沉淀,否则会极难溶解。
(4)本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
(5)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
 
标题 操作
R01056 哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒 下载
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