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2×Taq PCR MasterMix(不含染料)
2×Taq PCR MasterMix(不含染料)
英文名称:  
尺寸:  
特性:  
灭菌情况:  
储存条件: 冷冻(-20℃) 
● 产品简介:
本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂,浓度为2×。使用时,只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应,可最大限度的减少人为误差,具有快速简便、稳定性好等优点。适用于常规PCR反应、复杂模板(如GC含量高,有二级结构)的扩增以及大规模基因检测。使用该产品得到的PCR扩增产物末端含有一个A碱基,可以直接用于TA克隆。本试剂盒用于50微升的PCR反应体系。
● 组分和说明:
组分 R03012-40T R03012-100T
2×Taq PCR MasterMix (2X) 1ml 2.5mL
说明书 1份
● 质量控制:
经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余基因组DNA;能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。
● 使用说明:
1. 冰浴中彻底融化2×MasterMix,混匀后Minispin将溶液收集到管底。
2. 按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:
  50μl反应体系 终浓度
2×MasterMix 25μl
上游引物 10μM 1-5μl 0.2-0.8 μM
下游引物 10μM 1-5μl 0.2-0.8 μM
模板 × μl 10pg-1μg
补至50μl  
 
3. 快甩离心将反应液收集到管底。
4. PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。
5. PCR仪上执行以下程序:
步骤 温度 时间 循环数
初始变性 94℃ 5 min 1
变性 94℃ 30 sec 25-40*
退火 Tm-5℃* 30 sec
延伸 72℃ 1 min/kb
最后延伸 72℃ 5 min 1
 
*注: PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
注意事项
(1)由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍,在使用Taq酶时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
(2)Taq DNA polymerase在PCR过程中每循环的出错几率约为2.2×10-5,对于大于1kb的DNA片段的克隆推荐使用出错几率更低的DNA聚合酶,例如Pfu DNA polymerase、BeyoTaq DNA polymerase等。对于普通的PCR或RT-PCR定性检测或定量检测,Taq DNA polymerase是最佳选择。
(3)尽管本产品经过15次反复冻融后仍具有和冻融前几乎相同的PCR扩增效果,但仍宜适当避免反复冻融本产品,多次反复冻融可能使产品性能下降。
(4)使用本产品前,一定要完全融化,并上下颠倒轻轻混匀后才能使用,尽量避免起泡。
(5)本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
(6)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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R03012 2×Taq PCR MasterMix 下载
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