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PNGase F (N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F)
PNGase F (N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F)
中文名称: PNGase F (N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F) 
英文名称: PNGase F 
分子式:   分子量:  
CAS号: EINECS编号:  
储存条件: 见产品介绍 
中文别名:  
是否危险: 否 
产品简介
糖苷酶 F (PNGase F)是一种酰胺水解酶,经过和平空间站伊丽莎菌克隆,主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。N-糖苷酶 F (PNGase F)在酵母中重组表达(比活性:100000 U/mL),可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间的酰胺键,同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。本产品带his标签,常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化。
另外,我司还提供其他类型的糖苷酶,包括酵母重组表达的N-糖苷酶 F(比活性:750000 U/mL),内切糖苷酶H,内切糖苷酶S。
产品信息
产品性质
中文别名(Chinese synonym)
N-糖酰胺酶F;N-糖苷酶 F
英文别名(English synonym)
PNGase F
来源(Source)
酵母重组表达
分子量(Molecular weight)
36 kDa
比活性(Specific activity)
100000 U/mL
缓冲液组分(Buffer)
20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA, 50% Glycerol
酶活定义(Unit Definition)
1个酶活力单位指在10 μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。
储存条件
-25~-15℃保存,有效期1年。
使用方法
1、变性条件下蛋白质去糖基化:
1)在水中加入1 μL Buffer 1和目标糖蛋白(1-20 μg),至终体积10 μL;
2)100℃温度下煮沸10 min使其变性,冰上冷却,离心10秒;
加入2 μL的Buffer 2、2 μL的10%NP-40、6 μL去离子水,总反应体积20 μL;
加入1-2 μL的PNGase,轻轻混匀。在37℃孵育1-3 h。
2、非变性条件下蛋白质去糖基化:
1)在水中加入2 μL的Buffer 2和目标糖蛋白(1-20 μg)至最终体积为 20 μL。
2)加入 2~5 μL 的 PNGase F, 轻轻混匀。
3)37°C 孵育 4-24 h。
注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加PNGase F的量和延长孵育时间。
注意事项
1. PNGase F建议搭配我司提供的配套缓冲液使用,按我司说明书建议的操作量配套缓冲液足够。如您由于使用体系造成配套缓冲液不足,可咨询当地销售进行购买
2. 本产品仅作科研用途。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
COA搜索:
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