Live/Dead 染色（FDA/PI双染色）
原理：
二乙酸荧光素(FDA)能够进入细胞,但本身无荧光。在细胞的非特异性脂酶的催化下,FDA生成荧光素,后者经480nm激光激发出波长530nm左右的绿色荧光。死细胞的细胞膜不完整,生成的荧光素很快扩散出细胞,不能检测到带有绿色荧光的细胞。 碘化丙锭(PI)不能进入具有完整细胞膜的活细胞,当酵母细胞死亡或细胞膜不完整时,PI进入细胞,与DNA相结合,在488nm的激光激发下,在波长660nm左右检测到红色荧光。 因此,通过FDA/PI双染色的方法,利用死活细胞在经染色后会激发出不同波长的荧光的特点,即活细胞可检测到FDA产生的荧光信号,而无PI产生的荧光信号,死细胞则相反,这样就可以将死活细胞区分开来。
实验步骤：
1. 配置贮存液：配置FDA贮存液（5 mg/ml，溶于丙酮，储存于-20度）和PI 贮存液（5 mg/ml，溶于PBS或水，储存于4度）。
2. 染色时，将样品放置在孔板内，加入1mlPBS，再分别加入1μlFDA和1μlPI 贮存液（稀释1000倍），染色5min。
3. 洗弃染色液，PBS漂洗，荧光显微镜下观察、照相。
原理：
二乙酸荧光素(FDA)能够进入细胞,但本身无荧光。在细胞的非特异性脂酶的催化下,FDA生成荧光素,后者经480nm激光激发出波长530nm左右的绿色荧光。死细胞的细胞膜不完整,生成的荧光素很快扩散出细胞,不能检测到带有绿色荧光的细胞。 碘化丙锭(PI)不能进入具有完整细胞膜的活细胞,当酵母细胞死亡或细胞膜不完整时,PI进入细胞,与DNA相结合,在488nm的激光激发下,在波长660nm左右检测到红色荧光。 因此,通过FDA/PI双染色的方法,利用死活细胞在经染色后会激发出不同波长的荧光的特点,即活细胞可检测到FDA产生的荧光信号,而无PI产生的荧光信号,死细胞则相反,这样就可以将死活细胞区分开来。
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1. 配置贮存液：配置FDA贮存液（5 mg/ml，溶于丙酮，储存于-20度）和PI 贮存液（5 mg/ml，溶于PBS或水，储存于4度）。
2. 染色时，将样品放置在孔板内，加入1mlPBS，再分别加入1μlFDA和1μlPI 贮存液（稀释1000倍），染色5min。
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二． 准确订货：下订单时，买方应预先仔细审阅产品的技术指标，确认无误。不详之处应立即查询。订单及产品一经发出，即视为买方认可有关产品的技术指标。
三． 质量责任：我司保证所供产品质量与随货COA所列标准相符。买方应以产品制造商的标准作为验收标准。鉴于化学品的特殊性，卖方对未使用之前的产品质量负责，对化学品的应用不负有任何直接与间接的责任。卖方提醒买方：在做实验之前，预先按照技术规范检验产品质量。在产品开始使用之后，买方对应用及其结果负有全部责任。若有质量异议，买方需在收到货物后10个工作日内书面通知卖方，过期无效。
四． 有限保证：在适用法律允许的最大限度内，卖方提供的产品均“按现状条件”提供给买方，卖方不作对产品和/或其使用的各种明示或默示的保证（包括但不限于对适销性、适合用于特殊用途及不侵权的所有明示或默示保证）或卖方产品会达到任何特定结果或不会被中断或不会有错误的保证。
五． 责任限制：在适用法律允许的最大限度内，卖方不对以任何方式由本合同、卖方产品或使用卖方产品引起的或与此有关的任何利润或收入损失或其他后果性损失、随附性损失、特殊损失、惩罚性损失或任何其他间接损失或损害承担责任。在适用法律允许的最大限度内，卖方的最高赔偿限额为买方就所涉及的卖方产品实际支付给卖方的价格。
六． 如卖方因不可抗拒力原因无法供货，卖方将及时通知买方，双方将视情况决定部分不履行、全部不履行或延期履行；如供货期限届满日为国内外重大节日或国家法定假日，则供货期限顺延；若因缺货导致延期交货或无法供货，卖方将及时告知买方，并不视为卖方违约。不可抗力：因火灾、洪水、风暴、爆炸、恐怖事件、战争、政府行为或任何其他卖方无法预见、无法避免和无法克服的事件造成延期交货或无法交货的，卖方不承担任何责任。
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（2）常规试剂采用快递，运费以显示为准。
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